1、原理及適用范圍
腸出血性大腸桿菌O157:H7是一種新出現的食物傳播性疾病的病因。它除了引起腹瀉、出血性腸炎外，還可發(fā)生溶血性尿毒綜合癥、血栓性血小板減少性紫癜等嚴重的并發(fā)癥。自1982年美國發(fā)現因該致病菌引起的食物中毒以來，腸出血性大腸桿菌O157:H7疫情開始逐漸擴散和蔓延，相繼在英國、加拿大、日本等多個國家引起腹瀉爆發(fā)和流行。我國已陸續(xù)有十余個省份在市售食品、進口食品、腹瀉病患者、家畜家禽等分離到大腸桿菌O157:H7。大腸桿菌O157測試片(Filmplate^TM E.coli O157BO204)采用進口高選擇性顯色培養(yǎng)基作為主要原料，運用微生物測試片專有技術，做成一次性快速檢驗產品，一步培養(yǎng)15～24h就可確認，大大地簡化了檢測程序，非常適合各級檢驗部門和食品企業(yè)使用。本品適用于海產品、水產品、各類熟肉制品和冷葷、蛋及蛋制品等的快速檢測。參照標準：食品衛(wèi)生微生物學檢驗大腸埃希氏菌O157:H7/NM檢驗(GB/T4789.36-2008)。

2、操作方法
2.1、樣品處理：取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內，制成1:10的樣品勻液。
2.2、接種：將大腸桿菌O157測試片置于平坦實驗臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固，后用手輕輕地壓一下，每個稀釋度接種兩片，同時做一片空白陰性對照。
2.3、培養(yǎng)：將測試片疊在一起放回原自封袋中，并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內，堆疊片數不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。

3、結果判讀
對測試片進行觀察，呈紫紅色的菌落為大腸桿菌O157；呈藍色的菌落為其他大腸菌群。出現陽性菌落的樣本，建議用其他更為可靠的方法進行驗證，沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。

4、報告方式
報告每25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出大腸桿菌O157。

5、附加說明
5.1、本品所用培養(yǎng)基已在國外得到比較廣泛的應用，有關驗證試驗表明，接純菌種可以產生典型的紫紅色菌斑，準確率達到98%(K.A. Bettelheim. 1998. J. Clin. Microbiol.85：425-428)。
5.2、經本公司檢測，大腸桿菌O157測試片對純菌的檢測靈敏度為1CFU/mL。
5.3、注意使用過的測試片上帶有活菌，需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。

6、保存條件
本產品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質期為一年，鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中，一個月內用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現冷凝水，建議在拆封前將整包回溫至室溫。

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