本安瓿瓶已在凹頸處有割口，請(qǐng)以瓶子上的藍(lán)點(diǎn)為受力點(diǎn)，用手以柔力掰開(kāi)（注意：如安瓿瓶上沒(méi)有藍(lán)點(diǎn)的，則用砂輪在安瓿瓶的凹頸處劃痕，然后再掰開(kāi)）！本鑒定盒配套的塑料帽已滅菌。所有的安瓿瓶、吸塑架、塑料帽在使用后均高壓滅菌后方可棄去。

（二）出血性大腸桿菌O157：H7生化鑒定盒的詳細(xì)使用方法

出血性大腸桿菌O157：H7為革蘭氏陰性桿菌，需氧或兼性，有周鞭毛，并有菌毛，不產(chǎn)生芽孢的桿菌。發(fā)酵乳糖，不發(fā)酵或遲緩發(fā)酵山梨醇。氧化酶陰性。MUG陰性。從分離培養(yǎng)平板上挑取可疑菌苔接種于每種微量生化管內(nèi)。將已接種的生化管套上無(wú)菌塑料帽，直立于三折吸塑短架內(nèi)，于35－37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，結(jié)果觀察見(jiàn)表1。注意：如有特殊的接種方式或培養(yǎng)時(shí)間，請(qǐng)?jiān)斠?jiàn)每種生化管附帶的使用說(shuō)明。

表1

產(chǎn)品名稱	結(jié)果判定		培養(yǎng)時(shí)間（小時(shí)）	使用說(shuō)明
產(chǎn)品名稱	陽(yáng)性	陰性
山梨醇	黃色	紫色	8－24
纖維二糖
棉子糖
蛋白胨水	紅色	不變色	24	培養(yǎng)后加靛基質(zhì)試劑2－3滴，立即觀察結(jié)果。
西蒙氏枸櫞酸鹽	藍(lán)色	不變色	24－48	用接種針挑取新鮮菌苔在斜面上劃“之”字形接種，豎立培育。
鳥(niǎo)、賴氨酸脫羧酶	試驗(yàn)管藍(lán)綠色，對(duì)照管變黃	試驗(yàn)管與對(duì)照管均變黃	18－24	每株被檢菌應(yīng)同時(shí)接種氨基酸對(duì)照管一支，并加滅菌液體石蠟5-8滴覆蓋培養(yǎng)基表面。培養(yǎng)18－24小時(shí)，未見(jiàn)陽(yáng)性結(jié)果，繼續(xù)培養(yǎng)4天，再做終結(jié)果判定。
半固體瓊脂	擴(kuò)散生長(zhǎng)	無(wú)擴(kuò)散生長(zhǎng)	24—48	用接種針挑取新鮮菌苔穿刺接種，豎立培育。
三糖鐵瓊脂	產(chǎn)酸變黃色，產(chǎn)硫化氫變黑色	不變色	24	用接種針挑取新鮮菌苔穿刺，穿刺完畢后在斜面上劃“之”字形接種，豎立培育。
葡萄糖磷酸鹽胨水	MR：紅色	不變色	96	培養(yǎng)后加MR試劑2－3滴，立即觀察結(jié)果。
葡萄糖磷酸鹽胨水	VP：紅色	不變色	48	培養(yǎng)后依次加入8滴VP試劑甲液及4滴乙液，混勻，再培養(yǎng)10－20分鐘觀察結(jié)果。

試驗(yàn)項(xiàng)目	結(jié)果判定
山梨醇	陰性或遲緩
纖維二糖	陰性
棉子糖	陽(yáng)性
蛋白胨水	陽(yáng)性
西蒙氏枸櫞酸鹽	陰性
鳥(niǎo)氨酸脫羧酶	陽(yáng)性
賴氨酸脫羧酶	陽(yáng)性
半固體瓊脂	有動(dòng)力或無(wú)動(dòng)力
三糖鐵瓊脂	底及斜面呈黃色H₂S陰性
葡萄糖磷酸鹽胨水	MR 陽(yáng)性 VP 陰性

備注：本鑒定盒是按照產(chǎn)品目錄中的品種成份從左到右的順序擺放。

（三）出血性大腸桿菌O157：H7的和生化鑒定特征（見(jiàn)表2）

表2 大腸桿菌O157：H7的生化特征

試驗(yàn)項(xiàng)目	結(jié)果判定
山梨醇	陰性或遲緩
纖維二糖	陰性
棉子糖	陽(yáng)性
蛋白胨水	陽(yáng)性
西蒙氏枸櫞酸鹽	陰性
鳥(niǎo)氨酸脫羧酶	陽(yáng)性
賴氨酸脫羧酶	陽(yáng)性
半固體瓊脂	有動(dòng)力或無(wú)動(dòng)力
三糖鐵瓊脂	底及斜面呈黃色H₂S陰性
葡萄糖磷酸鹽胨水	MR 陽(yáng)性 VP 陰性

注：“+” 陽(yáng)性； “—” 陰性；“＋/－” 陽(yáng)性或陰性

凡用于上述方法在被檢食品中分離獲得的純菌落，經(jīng)用抗E.coli O157：H7標(biāo)準(zhǔn)血清或EHEC O157：H7。乳膠凝集試劑測(cè)試，呈陽(yáng)性結(jié)果即可報(bào)告為該食品試樣中檢出腸出血性大腸桿菌O157：H7。

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