A型流感病毒IgM抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：人A型流感病毒IgM抗體(FLU A IgM)定性檢測試劑盒（ELISA）

                 A型流感病毒IgM抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

英文名稱：Human FLU A IgM (FLU A IgM) ELISA KIT

【包裝規(guī)格】

48人份/盒，96人份/盒

【預(yù)期用途】
僅供科研使用，定性檢測血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中人A型流感病毒IgM抗體(FLU A IgM)的濃度。

【檢驗原理】
本試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。在預(yù)包被人A型流感病毒IgM抗體抗原（固相抗原，貨號：LT1020101C）的微孔酶標(biāo)板中，加入人A型流感病毒IgM抗體陰陽性性對照（貨號：LT1020101J）和待測樣本，溫育洗滌，再加入另一株HRP標(biāo)記的抗人A型流感病毒IgM抗體抗體（酶標(biāo)抗體，貨號：LT1020101E），經(jīng)過溫育與充分洗滌，去除未結(jié)合的組分，在微孔板固相表面形成固相抗原-抗體-酶標(biāo)抗體的夾心復(fù)合物。加底物A和B，底物在HRP催化下，產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，在終止液（2M 硫酸）作用下，最終轉(zhuǎn)化為黃色，在酶標(biāo)儀上測定吸光度（OD值），吸光度（OD值）與待測樣品中人A型流感病毒IgM抗體的濃度正相關(guān)，通過計算公式判斷樣品陰陽性。

【試劑準(zhǔn)備】
1、使用前，所有的組分都要至少復(fù)溫30min，確保充分復(fù)溫到室溫。
2、濃縮洗滌液：從冰箱取出的濃縮洗滌液，會有結(jié)晶產(chǎn)生，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解。濃縮洗滌液與蒸餾水，按1:20稀釋，即1份的濃縮洗滌液，添加19份的蒸餾水。
3、底物：底物液A和B，在使用前，按1:1體積充分混合，混合后15分鐘內(nèi)使用。

操作程序
1、所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫，標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品，建議做復(fù)孔。
2、按前面試劑準(zhǔn)備中描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液。
3、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
4、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL，樣本孔加待測樣本50μL，空白孔不加。
5、除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測抗體100μL。
6、用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
7、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置20s，甩去洗滌液，吸水紙上拍干。
8、如此重復(fù)4次（共洗板5次）。若使用自動洗板機(jī)，請按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應(yīng)板。
9、將底物A和B按1:1體積充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min。
10、所有孔加入終止液50μL，在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度（OD值）。

【檢驗結(jié)果的解釋】
檢測完成后，以陰性對照的OD+0.25，做為閾值，樣本OD值大于閾值，為陽性；樣本OD值低于閾值為陰性。

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