食品基因組DNA提取試劑盒
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品 牌：Qiagen英文名稱：DNeasy mericon Food Kit 中文名稱：食品基因組DNA提取試劑盒 從富集微生物的培養(yǎng)基、食物原材料或成品中提取高品質(zhì)DNA改良了CTAB方法，可更快的處理樣本從食物成品中高效的純化DNA片段快速、高效的裂解革蘭氏陰性和陽性細(xì)菌處理復(fù)雜食物樣本時不會殘留PCR抑制劑
- 產(chǎn)品描述
食品基因組DNA提取試劑盒
食品基因組DNA提取試劑盒mericon Sample Preparation Kits適用于從多種初始材料中提純高品質(zhì)核酸，如經(jīng)富集的培養(yǎng)基（mericon DNA Bacteria和 Bacteria Plus Kits）及多種食物原材料與成品（DNeasy mericon Food Kit）等。這些復(fù)雜食物樣本的純化產(chǎn)物中所含PCR抑制劑的水平達(dá)到最低。純化獲得的DNA適用于各種下游應(yīng)用，如應(yīng)用mericon PCR Assays Kits進(jìn)行real-time PCR成分鑒定、病原體檢測；或GMO DNA定量檢測。
特點 | 參數(shù) |
| 應(yīng)用 | PCR, real-time, genotyping |
| 洗脫體積 | 100 µl (mericon DNA Bacteria and DNA Bacteria Plus Kit), 150 µl (DNeasy mericon Food Kit) |
| 規(guī)格 | spin columns (DNeasy mericon food Kit), microcentrifuge tube (DNA Bacteria Kit), icrocentrifuge tube with glass beads (DNA Bacteria Plus Kit) |
| 主要樣本類型 | fod, e.g. chocolate, ketchup, cereals (DNeasy mericon Food Kit), bacterial culture from food (DNA Bacteria Kit and DNA Bacteria Plus Kt) |
| 處理 | manual |
| 純化總RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | DNA |
| 樣本量 | 1 ml culture (DNA Bacteria and Bacteria Plus Kit), 2 g (DNeasy mericon Food Kit) |
| 技術(shù) | silica technology (DNeasy mericon food Kit), boiling lysis (DNA Bacteria Kit), disruption with glass beads (DNA Bacteria Plus Kit) |
| 每次運行或制備時間 | 20 minutes - 1 hour (DNeasy mericon Food Kit) |
| 產(chǎn)量 | depends on DNA contents of the sample |
性能
DNeasy mericon Food Kit
生產(chǎn)過程中，食物容易受到熱、高壓和pH值變化的影響，這些會導(dǎo)致DNA降解和片段化。DNeasy mericon Food Kit中的優(yōu)化試劑專為回收短的DNA片段（100 bp）而設(shè)計，確保高度片段化的DNA可被有效分離，并在PCR反應(yīng)中進(jìn)行擴(kuò)增。憑借這些優(yōu)勢，DNeasy mericon Food Kit是*個可廣泛應(yīng)用于從強抑制性、多脂、酸性、有很高或很低DNA含量的加工食物中純化核酸的試劑盒，結(jié)果可靠，而且可得到純化效果（參見High yields of DNA with minimal inhibitor carryover）。
mericon DNA Bacteria和DNA Bacteria Plus Kits
熱裂解操作需使用mericon DNA Bacteria Kit，機(jī)械裂解需使用mericon DNA Bacteria Plus Kit，兩種試劑盒從革蘭氏陰性細(xì)菌中提取DNA的效率相同。但是，如果從革蘭氏陽性細(xì)菌中提取DNA，機(jī)械裂解更加有效（參見Efficient bacterial DNA extraction）。
原理
DNeasy mericon Food Kit
該試劑盒采用改良的CTAB純化細(xì)胞內(nèi)核酸。CTAB是非離子去污劑，廣泛用于從多種類型的組織樣本中高效提純細(xì)胞內(nèi)核酸。與鹽濃度相關(guān)，CTAB可能與細(xì)胞內(nèi)核酸結(jié)合（低鹽濃度）；也可與細(xì)胞內(nèi)的抑制劑結(jié)合，如多糖、蛋白質(zhì)和植物代謝產(chǎn)物（高鹽濃度，如在Food Lysis Buffer中）。
這種提純方法的步驟少于傳統(tǒng)CTAB 操作方法，應(yīng)用DNeasy mericon Food Kit可在2.5個小時內(nèi)可處理多達(dá)30個樣本（參見Efficient and rapid DNA extraction）。
經(jīng)優(yōu)化的方案，采用CTAB和蛋白酶K初步消化緊密組織，然后同時沉淀蛋白質(zhì)和其他細(xì)胞內(nèi)和來自于食品本身的抑制劑。
離心后抑制劑沉淀下來，而提純的DNA保留在溶液中。然后進(jìn)行l(wèi)v仿抽提，所有剩余的、未沉淀CTAB結(jié)合蛋白、CTAB結(jié)合雜質(zhì)或 CTAB 結(jié)合多糖都將與其他脂溶性抑制劑一起被抽提入lv仿層。水層中含有DNA和極少的抑制劑，將進(jìn)一步處理。在水相中加入結(jié)合緩沖液（調(diào)節(jié)結(jié)合條件），將其上樣到QIAquick Spin Column。純化后得到的DNA可即用于下游的mericon real-time PCR分析。
mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit
到目前為止，檢測食品病原體的主要方法是通過培養(yǎng)基和/或ELISA分析法。分子檢測方法，尤其是real-time PCR，經(jīng)常作為這些常用方法的補充。
熱裂解使用mericon DNA Bacteria Kit，適用于多數(shù)易于裂解的革蘭氏陰性細(xì)菌（如沙門氏菌Salmonella spp.、彎曲桿菌Campylobacter spp. 和阪崎氏腸桿菌Cronobacter spp.）。機(jī)械裂解需使用mericon DNA Bacteria Plus Kit，適用于革蘭氏陽性細(xì)菌，如單增李斯特菌Listeria spp.。
mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit中的化學(xué)試劑可較高程度上提高裂解效率，穩(wěn)定提純的DNA，并去除可能干擾下游應(yīng)用的抑制劑。
操作流程
DNeasy mericon Food Kit
使用簡單的操作方法，從勻質(zhì)的食物樣本中提純DNA，獲得的純DNA適用于各種下游應(yīng)用，如real-time PCR成份分析或GMO檢測。
mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit
使用機(jī)械裂解（鋼珠）和熱裂解（煮）的操作方法，從病原體富集的培養(yǎng)基中提純細(xì)菌DNA。兩種操作方法都需轉(zhuǎn)移細(xì)菌 DNA懸浮液，以適用于real-time PCR病原體檢測。
應(yīng)用
應(yīng)用DNeasy mericon Food Kit從食物原材料或成品中純化的DNA適用于各種下游應(yīng)用，如成份鑒定。
mericon Bacteria和Bacteria Plus Kits用于從經(jīng)過增菌富集培養(yǎng)基中純化細(xì)菌DNA。
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