呋喃它酮（AMOZ）ELISA法檢測(cè)試劑盒

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食品中肉質(zhì)類瘦肉精系列檢測(cè)：微生物、化學(xué)有害物質(zhì)、抗生素、水產(chǎn)、真菌毒素、獸藥殘留等

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農(nóng)藥殘留系列檢測(cè)：糧食中農(nóng)藥殘留

 呋喃它酮（AMOZ）ELISA法檢測(cè)試劑盒

原理及用途

本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法檢測(cè)蜂蜜、魚、蝦、禽、肝臟等中的呋喃它酮代謝物（AMOZ），試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、辣根酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測(cè)時(shí)，加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液，樣本中的呋喃它酮代謝物和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗呋喃它酮代謝物抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含呋喃它酮代謝物含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中呋喃它酮代謝物的殘留量。

2 技術(shù)指標(biāo)

2.1 試劑盒靈敏度：0.05ppb(ng/ml)

2.2 反應(yīng)模式：25℃，45min～15min

2.3 檢測(cè)下限：

組織、肝臟…………………………0.1ppb

蜂蜜、牛奶、腸衣…………………0.1ppb

奶粉、蛋粉、飼料…………………0.1ppb

魚/蝦等水產(chǎn)品組織因有一定干擾，定量下限為0.15ppb

5.3.1 牛奶樣本處理方法

1）取5ml樣本于離心管中，加250ul 亞硝基溶液（配液1）振蕩混合30秒，加250ul 硫酸鋅溶液（配液2）振蕩混合30秒，15℃4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘；

2）取上清1.1ml，加4ml去離子水、0.5 ml 1M 鹽酸溶液和100μl衍生化試劑，振蕩5分鐘；

3）在37℃過(guò)夜孵育(約16小時(shí))或50℃（超過(guò)50℃時(shí)會(huì)影響分層效果）水浴孵育3小時(shí)；

4）分別加入5ml 0.1M K₂HPO₄ 溶液，0.4ml 1M NaOH溶液和5ml的乙酸乙酯，振蕩5分鐘；

5）室溫下4000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘；

6）取出2.5ml的上層液到另一個(gè)離心管中，50-60℃氮?dú)饣蚩諝獯蹈桑?/span>

7）用1ml正已烷溶解殘留物，加入1ml復(fù)溶工作液充分振蕩混合30秒；室溫4000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘；

8）去除上層正已烷，取50μl下層液用于分析。

    樣本稀釋倍數(shù)為2    檢測(cè)下限：0.1ppb

5.3.2 奶粉、蛋粉樣本處理方法

1）稱取1±0.05g均質(zhì)樣于離心管中，加入4ml去離子水、0.5 ml 1M 鹽酸溶液和100μl衍生化試劑，振蕩5分鐘；

2）在37℃過(guò)夜孵育(約16小時(shí))或50℃（超過(guò)50℃時(shí)會(huì)影響分層效果）水浴孵育3小時(shí)；

3）加250ul 亞硝基溶液（配液1）振蕩混合30秒，加250ul 硫酸鋅溶液（配液2）振蕩混合30秒，15℃4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘；

4）取全部上清到另一個(gè)離心管中，后續(xù)接“5.3.1 牛奶樣本處理方法，4）”

5.3.3 蜂蜜、組織、腸衣、肝臟、飼料、雞蛋樣本處理方法

1）稱取1±0.05g均質(zhì)樣于離心管中，加入4ml去離子水、0.5 ml 1M 鹽酸溶液和100μl衍生化試劑，振蕩5分鐘；

2）后續(xù)接“5.3.1 牛奶樣本處理方法，3）”

5.3.4 熟食樣本處理方法

1）稱取1±0.05g均質(zhì)樣于50ml離心管中，加入4.5ml甲醇和0.5ml去離子水，振蕩2min，室溫4000轉(zhuǎn)/分，離心5分鐘，去除全部液體；

2）加入5ml乙氰和5ml正己烷，振蕩2min，室溫4000轉(zhuǎn)/分，離心5分鐘，去除全部液體；

3）在沉淀中加入4ml去離子水、0.5 ml 1M 鹽酸溶液和100μl衍生化試劑，振蕩5分鐘；

 8 注意事項(xiàng)

8.1 室溫低于25℃或試劑及樣本沒(méi)有回到室溫（25℃）會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。

8.2 在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

8.3 混合要均勻，洗板要*，在ELISA分析中的再現(xiàn)性，很大程度上取決于洗板的*性。

8.4 在所有孵育過(guò)程中，用蓋板膜封住微孔板，避免光線照射。

8.5 不要使用過(guò)了有效期的試劑盒，不要交換使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。

8.6 顯色液若有任何顏色表明變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.5個(gè)單位（A450nm< 0.5 ）時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。

8.7 反應(yīng)終止液有腐蝕性，避免接觸皮膚。

9 貯藏及保存期

儲(chǔ)藏條件：試劑盒于2-8℃保存，避免冷凍。

保 質(zhì) 期：該產(chǎn)品有效期為1年，生產(chǎn)日期見(jiàn)包裝盒

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