本試劑盒采用雙抗體夾心法，在預(yù)包被鼠源單抗-黃熱病毒特異性抗原復(fù)合物的反應(yīng)孔內(nèi)加入待測(cè)標(biāo)本，若標(biāo)本中有抗CHIV，則可在微孔板表面形成抗原-抗體復(fù)合物，再與酶標(biāo)二抗結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)二抗復(fù)合物，經(jīng)顯色系統(tǒng)顯色后，根據(jù)OD值判定有無(wú)YFV抗體的存在。

[試劑盒組成]

預(yù)包被反應(yīng)板 96孔×1塊
酶結(jié)合物 6ml×1瓶
YFV陰性對(duì)照 0.5ml×1瓶
YFV陽(yáng)性對(duì)照 0.5ml×1瓶
濃縮洗滌液 30ml×1瓶
樣品稀釋液 30ml×1瓶
顯色劑A、B液各6ml×1瓶
終止液（2M H2SO4） 5ml×1瓶
說(shuō)明書 1份

[儲(chǔ)存條件及有效期]

試劑盒應(yīng)置2-8℃中避光保存，有效期12個(gè)月。

[適用儀器]

微量移液器和潔凈的吸頭
37℃恒溫箱或水浴鍋
計(jì)時(shí)器
洗板機(jī)
振動(dòng)器
酶標(biāo)儀檢測(cè)波長(zhǎng)450nm，參考波長(zhǎng)630nm。

[樣本要求]

樣本采集不需要特殊準(zhǔn)備，按照正常的采血技術(shù)收集血液，全血標(biāo)本先放置37℃處理2小時(shí)，3000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘以上，使血清（漿）不含或極少含血細(xì)胞。如果為抗凝血樣本，樣本離心后，再室溫放置2小時(shí)以上。
樣品可以使用血清或者血漿，檸檬酸，肝素或EDTA等抗凝劑不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
樣品中含用疊氮鈉會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，高度溶血的樣品、沒有*收縮的血清樣品或者有微生物污染的樣品可能會(huì)引起錯(cuò)誤結(jié)果。
新鮮的樣品在2-8℃無(wú)菌條件可保存一個(gè)星期，新鮮樣品可長(zhǎng)期貯存-20℃或以下，避免反復(fù)凍融。

[檢驗(yàn)方法]

從冷藏環(huán)境中取出試劑盒，在室溫下平衡30分鐘，同樣將濃縮洗滌液做1:20稀釋。
待測(cè)樣本用樣本稀釋液1:1000稀釋，每孔加入100μl，并設(shè)陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照各2孔，分別加入陰、陽(yáng)性對(duì)照100μl，再設(shè)空白對(duì)照1孔，置37℃溫浴60分鐘，棄去孔內(nèi)樣本，拍干。
洗板：

手工洗板：棄去反應(yīng)板條孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干；用洗滌液注滿每孔，勿溢出，靜置5-10秒，棄去孔內(nèi)洗滌液拍干，如此反復(fù)5次，拍干。
洗板機(jī)洗板：選擇洗滌5次的程序洗板，洗液盈注滿每孔，并確保每次吸凈無(wú)殘留，zui后在吸水紙上拍干。

每孔加酶結(jié)合物100μl，空白對(duì)照孔不加，貼上膠紙，置37℃孵育30分鐘，同上洗板5次。
每孔加顯色劑A液、B液各50μl，輕輕振蕩后，置37℃避光孵育15分鐘。
每孔加入終止液50μl終止反應(yīng)，空白調(diào)零，在酶標(biāo)儀中讀取各孔OD值（450nm/630nm）。

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